MTHFR (Metylentetrahydrofolat reduktase) i blod

homocystein, hyperhomocysteinemi, MTHFR-genotype

• Utredning av arvelig hyperhomocysteinemi ved høye homocysteinnivåer i plasma.
• Behandling med cytostatika som for eksempel metotreksat, fluoropyrimidiner og platinaforbindelser.
  • Se www.anx.no/mthfr for mer informasjon.

Bestilles fortrinnsvis elektronisk.

Ved behov for papirrekvisisjon, se Rekvisisjon for eksterne rekvirenter Medisinsk biokjemi og Farmakologi, Radiumhospitalet og Rikshospitalet

Interne rekvirenter benytter rekvisisjon med barkodeetiketter, se Bestilling av analyser og rekvisisjoner (Laboratorietjenester (OUS)).

Materiale: EDTA-fullblod (EDTA-rør)

Minste prøvevolum: 0,5 mL (helst 1 mL) fullblod. 

Benytt 4- eller 2 mL rør med EDTA-blod. Analyseinstrumentene er kun tilpasset for denne størrelsen. 

Pasientforberedelse

Ingen

Se eventuelt generell informasjon om Blodprøvetaking og Oversikt over prøvevolum i standard prøvetakingsrør

Holdbarhet

Prøven er holdbar flere døgn i romtemperatur, men oppbevaring i kjøleskap anbefales. Ved lengre tids lagring ( >1 mnd) bør prøven fryses.

Forsendelse: Ordinær post, kan sendes ved romtemperatur.

For OUS-interne rekvirenter: se Levering av prøver – Medisinsk biokjemi OUS

For eksterne rekvirenter, se Prøveforsendelse

 Avdeling for medisinsk biokjemi, Rikshospitalet.

Vanligvis innen 2 uker, ta kontakt dersom det haster mer.

Rikshospitalet

Sanntids PCR med alleldeteksjon vha. hybridiseringsprober og smeltekurveanalyse på LightCycler® 480 (Roche) instrument.

Analysen omfatter undersøkelse av følgende MTHFR-genvarianter (alleler):

• NM_005957.4:c.665C>T (rs1801131); NP_005948.3:p.Ala222Val
  • (Varianten er tidligere kjent som c.677C>T)
• NM_005957.4:c.1286A>C (rs1801133); NP_005948.3:p.Glu429Ala
  • (Varianten er tidligere kjent som c.1298A>C)

Funksjon av MTHFR-enzymet

• MTHFR-enzymet spiller en viktig rolle i metabolismen av folat og homocystein.
  • MTHFR katalyserer omdannelsen av 5,10-metylentetrahydrofolat til 5-metyltetrahydrofolat, som igjen fungerer som en metyldonor og bidrar til at homocystein omdannes til metionin av enzymet metionin syntase. Denne reaksjonen trenger i tillegg vitamin B12.
• MTHFR-enzymet er involvert i DNA-syntese og -metylering.

MTHFR-genvarianter

• De best karakteriserte MTHFR-genvariantene er c.665C>T (tidligere kjent som c.677C>T) og c.1286A>C (tidligere kjent som c.1298A>C).
  • MTHFR c.665C>T gir en aminosyreendring (p.Ala222Val) som resulterer i termolabilt enzym og redusert enzymaktivitet.
  • MTHFR c.1286A>C gir en aminosyreendring (p.Glu429Ala) og er assosiert med noe redusert enzymaktivitet.

Klinisk betydning av MTHFR-genvarianter

• MTHFR-genvarianter som gir redusert MTHFR-enzymaktivitet kan føre til forhøyede homocysteinnivåer, særlig ved lave folatnivåer.

  • Høye homocysteinnivåer er assosiert med økt risiko for ulike sykdommer (f.eks. hjerte-/karsykdom).

• MTHFR-genvarianter og MTHFR-enzymaktiviteten har også blitt rapportert å kunne påvirke effekten/toksisiteten av cytostatika som bl.a. metotreksat, syklofosfamid, fluoropyrimidiner og platinaforbindelser.

Svarrapportering

• MTHFR-genotype (allelkombinasjon) rapporteres basert på det samlede resultatet etter analyse av MTHFR-variantene c.665C >T (tidligere kjent som c.677C >T) og c.1286A >C (tidligere kjent som c.1298A >C).
• Genotypesvaret inkluderer en kort tolkning av betydningen av MTHFR-genotype i forhold til homocysteinnivåer.
• Forekomst av andre sjeldne sekvensvarianter som kan ha betydning for MTHFR-enzymaktiviteten kan ikke utelukkes.

Svartolkning

Utredning av forhøyet homocystein:

• Svar: Ingen av de undersøkte sekvensvariantene er påvist (dvs. C/C i posisjon c.665 og A/A i posisjon c.1286).
  • Tolkning: Genotypen påvirker sannsynligvis ikke MTHFR-aktivitet og homocysteinkonsentrasjon i særlig grad.
     
• Svar: Pasienten er heterozygot C/T i posisjon c.665 i MTHFR-genet, og evt. også heterozygot A/C i posisjon c.1286.
  • Tolkning: Genotypen kan gi redusert MTHFR-enzymaktivitet og føre til lett økt homocysteinkonsentrasjon, særlig ved lave folatnivåer. Behandling med folsyre kan i så fall redusere homocysteinkonsentrasjonen.
     
• Svar: Pasienten er heterozygot C/T i posisjon c.665 i MTHFR-genet og i tillegg homozygot C/C i posisjon c.1286.
  • Tolkning: Genotypen er assosiert med redusert MTHFR-enzymaktivitet og kan føre til økt homocysteinkonsentrasjon, særlig ved lave folatnivåer. Behandling med folsyre kan i så fall redusere homocysteinkonsentrasjonen.
     
• Svar: Pasienten er homozygot T/T i posisjon c.665 i MTHFR-genet, og evt. også heterozygot A/C eller homozygot C/C i posisjon c.1286.
  • Tolkning: Genotypen er assosiert med redusert MTHFR-enzymaktivitet og kan føre til økt homocysteinkonsentrasjon, særlig ved lave folatnivåer. Behandling med folsyre kan i så fall redusere homocysteinkonsentrasjonen.
     
• Svar: Pasienten er heterozygot A/C eller homozygot C/C i posisjon c.1286 i MTHFR-genet (men normalsekvens, dvs. C/C, i posisjon c.665).
  • Tolkning: Genotypen påvirker sannsynligvis ikke MTHFR-aktivitet og homocysteinkonsentrasjon i særlig grad.
     

Klinisk betydning av MTHFR-genotype avhenger også av andre faktorer som påvirker homocysteinnivåer som f.eks.:

• Livsstil
  • Kosthold og vitamininntak, røyking, alkohol
• Sykdommer
  • Maligne tilstander, hypotyreose, reumatoid artritt, nyresykdommer
• Legemidler
• Alder, graviditet

Ved spørsmål om analyse og tolkning i forhold til utredning av forhøyet homocystein, ta kontakt med Seksjon for medfødte metabolske sykdommer, Avd. for medisinsk biokjemi, OUS, Rikshospitalet på tlf.: 23 07 10 48

For mer informasjon om MTHFR-genanalyse i forbindelse med legemiddelbehandling, se www.anx.no/mthfr

Usikkerhet 

Pasientens genotype er i utgangspunktet stabil og uendret gjennom hele livet. Det er således normalt ikke indisert å gjenta en genotyping hvis den er utført tidligere og svaret er tilgjengelig for rapportering.

Unntak kan være:

• Ønske om ny genotyping med en mer omfattende metode: Hvis man tidligere bare har fått undersøkt én eller noen få DNA-sekvensvarianter i det aktuelle genet, kan det være aktuelt å teste påny med en ny eller mer omfattende metode som fanger opp flere varianter.
• Pasienten er transplantert: Stamcelletransplantasjon tilfører donorleukocytter, noe som vil gi endret genotype ved analysering av blodprøve. Organtransplantasjon tilfører organ med donors genotype. Blodceller og øvrige vev er da uendret.
• Mistanke om feil: Selv om det er sjelden, kan det forekomme berettiget mistanke om feil genotyperesultat. I så fall kan ny genotyping være indisert. I tillegg til prøveforbytning eller feil knyttet til analysering eller rapportering, kan det ved leukopeni i forbindelse med graviditet eller hos personer som får ordinær blodoverføring (én enhet SAG-blod kan inneholde inntil 1 million leukocytter) forekomme at det i en periode på inntil noen måneder blir en tilblanding og proliferasjon av fosters eller blodgivers leukocytter (mikrokimerisme) som kan gi endret genotyperesultat.
• Klonal ekspansjon av mutert cellelinje hos pasienten.

Ikke relevant.

Forekomsten av MTHFR-genvarianter varierer mellom folkegrupper.

Frekvens av MTHFR-genvarianter (allelfrekvens):

• MTHFR c.665C>T: Ca. 12 - 37% blant kaukasiere, 20 – 22% blant asiater og rundt 13% i populasjoner fra Afrika.
• MTHFR c.1286A>C: Ca. 26 - 35% blant kaukasiere, 39 - 51% blant asiater og 12 - 15% i populasjoner fra Afrika.