Epstein-Barr virus DNA kvantitering

• Overvåkning av EBV infeksjon hos immunsupprimerte
• Utredning ved alvorlige former for EBV infeksjon

EDTA fullblod

For analyse i andre prøvematerialer, se: Epstein-Barr virus DNA (sendeprøve til OUS-Rikshospitalet).

Se det enkelte prøvemateriale:

EDTA fullblod (PPT-rør)

Kvantitativ påvisning av Epstein-Barr virus DNA ved hjelp av sanntids polymerasekjedereaksjon (PCR).

Analyseres på Cobas 6800 fra Roche. Benytter kit'et cobas® EBV.

Testen er basert på helautomatisk prøvepreparering (ekstraksjon og rensing av nukleinsyre) etterfulgt av PCR amplifikasjon og deteksjon. Virusmengden kvantiteres i forhold til en non-EBV-DNA kvantiteringsstandard (DNA-QS), som tilsettes i hver prøve under prøveprosessering.

Målgen: to målområder fra høykonserverte regioner av EBV lokalisert i EBV EBNA-1-genet og EBV BMRF-genet.

Deteksjonsgrense: 20 IU/ml

Nedre kvantiteringsgrense for analysen: 35 IU/ml

Øvre kvantiteringsgrense for analysen: 100 000 000 IU/ml

Påvist / Ikke påvist.

Ved påvisbart virus DNA angis tallverdi i IU/mL.

1-3 dager

For EBV DNA kvantitering utført i plasma ved Ahus gjelder følgende:

< 35 IU/mL: Lav virusmengde, under analysens nedre kvantiteringsgrense. Som oftest uten klinisk betydning.

< 100 IU/mL: Lav virusmengde

100-1000 IU/mL: Moderat virusmengde

>1000 IU/mL: Høy virusmengde

Ahus tilbyr kvantitativ EBV PCR i humant EDTA plasma. Kvantitativ EBV DNA PCR har tidligere kun vært tilgjengelig på Rikshospitalet i fullblod. Det er viktige forskjeller mellom analysene på Ahus og Rikshospitalet, både med tanke på prøvemateriale og analyseplattform. Dette medfører at resultatene for EBV-DNA ved Ahus ikke kan sammenlignes direkte med tidligere resultater der analysen er utført ved Rikshospitalet. 

Kvantitativ EBV PCR ved Ahus analyseres i EDTA-plasma, mens Rikshospitalet benytter fullblod for denne analysen. Siden EBV viruset ligger latent i B-celler vil EBV viruset i disse cellene detekteres ved analysering av fullblod. Dette medfører at en større andel prøver er svakt positive for EBV DNA dersom en analyserer i fullblod sammenliknet med plasma. Den kliniske signifikansen av lave positive verdier i fullblod ofte er usikker, men påvises derimot EBV DNA i plasma er det bedre korrelasjon med EBV-assosiert sykdom.

Ved EBV kvantitering i plasma vil færre pasienter ha påvistbart EBV DNA sammenliknet med analyse i fullblod. Pasienter med EBV-assosiert sykdom vil ha påvisbart EBV DNA i plasma, men i lavere nivåer sammenliknet med testing i fullblod.

Dersom en pasient skal følges over tid mtp utvikling av- eller respons på behandling av EBV-relatert sykdom er det svært viktig at samme test benyttes til å monitorere endringer i virusnivå. Hva man oppfatter som signifikant virus-DNA-nivå vil variere basert på hvilken test som er benyttet. Hos mange er det ikke tallverdien i seg selv, men endringer i virus-nivå over tid som er viktigste tegn på utvikling av EBV-assosiert sykdom. Det er her svært viktig å følge opp pasienten med samme test.

For visse pasienter vil det være fornuftig å sende prøve til Rikshospitalet for analyse i fullblod (f.eks for pasienter som behandles både ved Rikshospitalet og Ahus). Det er fortsatt mulig å sende prøve til OUS-Rikshospitalet for EBV DNA kvantitering i fullblod. Dette kan i dips bestilles under analysegruppe 21, sendeprøver mikrobiologi.