PROSIGNA TEST (Prognostisk gensignatur analyse for brystkreft)

Til bruk for beslutninger om adjuvant behandling for pasienter som er operert for brystkreft. Testen anvendes etter retningslinjer fra nasjonalt handlingsprogram med retningslinjer for diagnostikk, behandling og oppfølging av pasienter med brystkreft.

Formalin Fiksert Parafininnstøpt (FFPE) brysttumorvev snittes og legges på positivt ladet objektglass (Superfrost Plus).

• 1-6 ufarget FFPE-snitt som er 10 µm tykk. Antall ufarget snitt som trenges til testen, beregnes ut fra tumorarealet på et farget snitt, se tabell 1. Ved tvil, send 6 ufarget snitt.

Tabell 1. Anbefalt antall snitt basert på tumorareal.

• 1 HE-farget snitt som er 4-5 µm tykk. HE-snittet skjæres som siste snitt, dvs. etter ufarget snittene til Prosigna test.

Ikke bruk vevsprøver/blokk hvor tumorareal er mindre enn 4 mm² eller andel tumorceller innenfor tumorarealet er mindre enn 10 %. Ved utilstrekkelig tumorareal eller tumorceller, vil det mest sannsynlig ikke være nok RNA for å bruke i Prosigna testen.

Analysen rekvireres i LVMS (LabVantage Medical Suite) som er laboratoriedatasystemet til patologi. Husk å oppgi:

• Antall lymfeknuter infisert med tumor (ingen funnet, 1-3 eller ≥ 4).
• Tumorstørrelsen (≤ 2 cm eller > 2 cm).

Prosigna test er IVD- og CE-merket og utføres med instrument NanoString nCounter Dx FLEX analysesystem. Testen benytter RNA som ekstraheres fra FFPE (formalin fiksert parafininnstøpt) brysttumorsvevssnitt. Gensspesifikke probepar hybridiseres direkte til mRNA i prøven og måling av genuttrykk registreres ved digital avlesning av antall hybridiserte mRNA-kopier. Analysen kartlegger genuttrykksprofilen til tumoren basert på 50 ulike gener (PAM50). Genuttrykksprofilen, lymfeknutestatus og tumorsstørrelse inngår i en algoritme som angir en iboende molekylær subtype til tumoren, en ROR-score (Risk Of Recurrence) og en risikogruppe. ROR-score beregning er basert på genuttrykksprofilen og tumorsstørrelsen. Algoritmen tolker ROR-scoren med cutoff-verdier og sammen med lymfeknutestatusen angis en risikogruppe. ROR-score er et heltall på en skala fra 0-100 som er relatert til pasientens sannsynlighet for fjernmetastase innen 10 år.

Analysens algoritme vil beregne og rapportere:

• Molekylær subtype: Luminal A, Luminal B, HER2-beriket eller Basalcelle lignende.
• ROR-score (risiko for tilbakefall): en tallverdi fra 0-100.
• Risikokategori: lav, middels (intermediær) eller høy.
• Sannsynlighet for metastase innen 10 år: en tallverdi i prosent.

Analysen settes opp en gang per uke. Forventet svartid vil være 5-10 arbeidsdager.

• Ekstrahert RNA som ikke oppfyller kvalitet- og kvantitetskrav i henhold til laboratoriums prosedyre, vil ikke bli brukt videre til Prosigna test.
• Biologisk variasjon som tumorheterogenitet kan bidra til ulike subtype resultater hvis Prosigna test gjentas med nye snitt fra samme tumor. Prosigna test har en reproduserbarhet på 97 % for subtype klassifisering.

• Nasjonalt handlingsprogram med retningslinjer for diagnostikk, behandling og oppfølging av pasienter med brystkreft https://www.helsedirektoratet.no/retningslinjer/brystkreft-handlingsprogram
• Leverandørens Prosigna hjemmeside https://www.prosigna.com