CD3+, CD4+, CD8+, CD19+ og CD16+56+ lymfocytter

Utredning av medfødte (primære) og ervervede (sekundære) immunsvikttilstander hvor kvantitering av T- og B-lymfocytter og NK-celler er en viktig del av diagnostikken. Oppfølging av pasienter med HIV eller AIDS for vurdering av behandling og prognose.

Immunsvikt mistenkes når infeksjonshyppighet og alvorlighet overskrider det som anses som normalt. Andre vanlige årsaker til recidiverende infeksjoner skal være utelukket. Kvantitering av lymfocyttsubpopulasjoner, Immunglobuliner og subklasser, samt komplementfunksjonstester er viktige førstehåndsanalyser i utredning av slike tilstander.

CD (Cluster of differentiation) er markører på overflaten av cellene som hjelper med å skille de forskjellige cellene fra hverandre (se tabell 1).

CD3-positive celler er T-lymfocytter. Disse deles videre i CD4-positive (hjelpeceller) og CD8-positive (cytotoksiske) T-celler. CD3-negative lymfocytter skilles i CD19-positive B-lymfocytter og CD16 og CD56-positive NK-celler.

Kvantitering av lymfocyttsubpopulasjoner brukes som ledd i diagnostikk og monitorering av ulike former for primær og sekundær immunsvikt, samt monitorering av immunterapi med legemidler (T-celle antistoff, cytotoksiske legemidler) eller for vurdering av sykdomsprogresjon (se tabell 2).

Ved oppfølgning av HIV-relatert immunsvikt kvantiteres kun CD3+, CD4+ og CD8+ lymfocytter.

CD4+ lymfopeni

• Primære immunsvikttilstander: SCID (alvorlig kombinert immunsvikt), CVID (allmenn variabel immunsvikt) m.m.
• Sekundære immunsvikttilstander: HIV infeksjon, immunsuppressiv behandling, virusindusert lymfopeni (morbilli, influensa, rubella), kronisk tretthet syndrom, akutt bakteriell infeksjon, ved idiopatisk CD4+ lymfopeni m.m.

Ved HIV infeksjon

CD4-antigenet er en reseptor for Humant Immunsvikt Virus (HIV). Totalantall CD4-positive celler brukes til å kontrollere sykdomsprogresjon og effekt av behandling hos HIV-pasienter. Antall CD4-positive celler avtar etter hvert som sykdommen progredierer. For klassifisering av immunsvikt ved HIV infeksjon brukes det tre nivåer av antall på CD4-positive celler (med økende immunsuppresjon):

1. 0,50 x 10⁹/L
2. 0,20 - 0,50 x 10⁹/L
3. < 0,20 x 10⁹/L

Antall CD8-positive celler øker kompensatorisk som følge av fall på CD4+ celler. CD8+ celler telles sammen med CD4+ og CD3+ celler. Lavere CD4:CD8-ratio er forenlig med progresjon av sykdommen.

CD8+ lymfopeni

• Karakteristisk for zap-70 kinasemangel (primær immunsvikt).
• Ellers ser man CD8+ lymfopeni som regel ved de samme tilstander som CD4 lymfopeni.

CD4+ og CD8+ lymfocytose

Kan forekomme som normal reaksjon på infeksjon eller ved lymfoproliferative tilstander. Isolert forhøyede tall på CD8+ celler finnes som kompensatorisk økning ved HIV infeksjon så vel som ved initiale stadier av CMV hhv. EBV infeksjoner. Monitorering av CD8+ celler ved de to sistnevnte infeksjoner har liten klinisk verdi.

CD 19+ lymfocytter (B-celler)

B-lymfopeni sees ved X-knyttet agammaglobulinemi, noen form for SCID mm. Høye tall ses ved infeksjoner.

CD16+56+ lymfocytter (NK-celler)

I denne analysen defineres NK-celler som CD3^-/CD16⁺56⁺ celler. På denne måten analyseres alle NK-celler i blodet.

Manglende/lave NK-celler finnes ved medfødt NK-celle immunsvikt (sjelden tilstand), ved CVID mm. Økte antall på NK-celler ser vi ved initiale faser av virusinfeksjoner.

Abnormal profil på lymfocytter sees videre bl.a. ved lymfomer, maligniteter, proteintap enteropati, overtrening syndrom m.m.

Celleforandringer in vitro.

Akutte infeksjoner, behandling med steroider eller andre immunsuppresiva, generell anestesi.

Flowcytometri. Ved hjelp av monoklonale antistoffer konjugert til fluorokromer undersøkes cellene for uttrykk av ulike antigener (fenotype).

EDTA-blod, minst 1 mL. Prøvetakingstidspunktet må angis.

Holdbarhet

Alle prøver til flowcytometri skal oppbevares ved romtemperatur, da kulde kan denaturere CD-molekyler. Prøvene har kort holdbarhet, se nedenfor:

Hiv-oppfølging (CD3, CD4, CD8): 24 timer etter prøvetakning

Immunsvikt (CD3, CD4, CD8, CD19, CD16/56): 24 timer etter prøvetakning

Prøver til flowcytometri analyseres mandag-fredag. På grunn av kort holdbarhet på prøvematerialet, kan prøven ikke tas etter kl. 12 på fredag, og prøvene kan heller ikke tas i helgen. Det analyseres ikke prøver til flowcytometri på helligdager.

• Tabell 1: CD-markører brukt for å skille de forskjellige Lymfocytt subpopulasjonene.

• Tabell 2: Forandringer i lymfocyttsubpopulasjoner i noen definerte immunsvikttilstander

• Tabell 3: Normale Lymfocytt subpopulasjoner etter alder