Mykobakteriedyrkning

Mistanke om infeksjon med Mycobacterium tuberculosis- komplekset (MTB) eller andre non-tuberkelkuløse mykobakterier (NTM). Se også Mykobakterier.

• Luftveisprøver: ekspektorat, bronkialskyllevæske, indusert sputum, larynxaspirat. Minimum prøvevolum minst 3- 5 ml i sterilt beholder uten tilsetning
• Ventrikkelaspirat: ca. 10 ml, tilsatt natriumbikarbonat- løsning til ph ca.7 (sjekkes med urinstix)
• Biopsier/vev, aspirat: Ta så stort volum som mulig i sterilt beholder tilsatt noe sterilt salvann for å hindre uttørring av prøven
• Sterile kropsvæsker (ascites, pleuravæske, pericardvæske, leddvæske):Ta så mye materiale som mulig i steril beholder uten tilsetning
• Spinalvæske: minst 2 ml, helst 5 ml hos voksne
• Sekret fra overfladiske sår/puss: Ta så mye materiale som mulig, i steril beholder uten tilsetning, evt. i Amies transportmedium
• Fæces: minst 1 gr. uten tilsetning
• Urin: morgenurin, midtstrømsprøve, 50-100 mL i steril beholder uten tilsetning
• Benmargaspirat: minst 3 ml aspirat overføres til BACTEC MYCO F lytic (rød kork)
• Blodkultur på BACTEC MYCO F lytic (rød kork) ved mistanke om miliær TB eller disseminert MAC-infeksjon hos immunsupprimerte

Elektronisk rekvirering anbefales.

Rekvirenter uten slik tilgang, se Rekvisisjoner.

Alle prøver, unntatt prøver fra sterile områder, blir forbehandlet med NaOH/ N-acetyl-L-cystein (NALC)-løsning.

Målet er å oppnå dekontaminering, homogenisering og oppkonsentrering av prøvemateriale.

Prøven sendes samme dag. Hvis ikke, må prøven oppbevares kjølig (2-8ºC) før forsendelsen og sendes raskest mulig. Prøveglass sendes i passende transporthylse.

Blod og beinmargaspirat tilsendt på BACTEC MYCO F lytic (rød kork) oppbevares i romtemperatur før forsendelsen.

Metoden omfatter dyrkning og eventuelt resistensbestemmelse:

• Dyrkning utføres på spesielle medier avhengig av prøvemateriale. Alle prøver dyrkes i semi-automatisert dyrkningsystem med døgnavlesning (BACTEC MGIT 960). Utvalgte prøver dyrkes i tillegg på faste medier (Løwenstein-Jenssen eller Middelbrook 7H10).
• Identifikasjon utføres ved hjelp av molekylærgenetisk metode: PCR eller 16S rRNA gensekvensering.
• Resistensbestemmelse utføres på alle førstegangs MTB- isolater og hver 3. måned på dyrkningpositive kontrollprøver.
• Resistensbestemmelse utføres primært på følgende medikamenter: ethambutol, rifampicin, isoniazid og pyrazinamid
• Utvidet resistensbestemmelse av MDR-isolater utføres ved ref. labortatoriet (FHI)
• Resistensbestemmelse av hurtigvoksende atypiske mykobakterier utføres på første isolatet og en gang i året deretter dersom isolatet vurderes som klinisk relavant
• Resistensbestemmelse utføres med MIC-bestemmelse for bla. clarithromycin, amikacin, doxycyclin, trimetoprim-sulfa, linezolid og tigecyclin
• Resistensbestemmelse av langsomt voksende atypiske mykobakterier utføres ikke rutinemessig

I tillegg undersøkes prøver mhp MTB-kompleks DNA, eventuelt med MTB-kompleks DNA hurtigtest der også genotypisk rifampicinresistens kan påvises direkte i prøvemateriale.

• Enhet for bakteriologi, OUS Ullevål
• Enhet for bakteriologi, OUS Rikshospitalet

• Dyrkning: Negativ/ Positiv med artsnavn og mengdeangivelse
• Resistensbestemmelse av MTB- komplekset: rapporteres med S (sensitiv), I (intermedier), R (resistent). Resistensbestemmelse av hurtigvoksende NTM rapporteres med MIC-bestemmelse og stjerne

Mikroskopi: 1-2 virkedager.

Dyrkning/identifikasjon:

• dyrkning er som oftest positiv etter 2-3 uker.
• Negativ dyrkning ca. 6-8 uker fra prøven er mottatt og registrert.

Resistensbestemmelse: ca. 2 uker etter isolering og vekst av renkultur.

Alle nye funn av M. tuberculosis-komplekset ringes til rekvirent.

Funn av M. tuberculosis kompleks er diagnostisk og medfører behandling.

Funn av andre mykobakterier kan være klinisk relevant avhengig av art, mengder, lokalisasjon og klinikk.

• Mikroskopi har høy spesifisitet og sensitivtet på ca. 60%
  • Negativ mikroskopi utelukker ikke infeksjon med mykobakterier
  • Sensitivitet øker med antall prøver fra samme pasient og lokalisasjon
  • Positiv mikroskopi påviser tilstedeværelse av syrefaste staver i prøvemateriale, men ikke mykobakteriearten
• Dyrkning har høy sensitivitet, men negativ dyrkning utelukker ikke infeksjon.
  • Sensitivitet øker med antall prøver fra samme pasient og lokalisasjon
  • Antall kolonier avspeiler mengden levende mykobakterier - dyrkningsprøver egner seg derfor til kontroll av behandlingseffekt, i motsetning til PCR

Tuberkulose er en nominativt meldepliktig sykdom (Gruppe A).

Se Meldepliktige sykdommer til MSIS

Analysen er akkreditert etter ISO 15189.

• FHI Tuberkuloseveilederen: Diagnostikk av klinisk tuberkulose
• FHI Tuberkuloseveilederen (startside)
• Tuberkulose -verktøy for helsepersonell
• Atypisk mykobakterieinfeksjoner (mykobakterieinfeksjoner med NTM) - veileder for helsepersonell