Mykobakteriedyrkning

Mistanke om infeksjon med Mycobacterium tuberculosis- komplekset (MTB) eller andre non-tuberkelkuløse mykobakterier (NTM). Se også Mykobakterier.

• Luftveisprøver: Bronkialskyllevæske, Indusert sputum, Ekspektorat, larynxaspirat. Minimum prøvevolum minst 3- 5 ml i sterilt beholder uten tilsetning.
• Ventrikkelaspirat: ca. 10 ml, tilsatt natriumbikarbonat- løsning til ph ca.7 (sjekkes med urinstix).
• Biopsi/vev, aspirat: Ta så stort volum som mulig i sterilt beholder tilsatt noe sterilt salvann for å hindre uttørring av prøven.
• Sterile væsker (ascites, pleuravæske, pericardvæske, leddvæske):Ta så mye materiale som mulig i steril beholder uten tilsetning.
• Spinalvæske: minst 2 ml, helst 5 ml hos voksne.
• Sekret fra overfladiske sår/ puss: Ta så mye materiale som mulig, i steril beholder uten tilsetning, evt. i eSwab transportmedium.
• Fæces: minst 1 gr. uten tilsetning.
• Urin: morgenurin, midtstrømsprøve, 50-100 mL i steril beholder uten tilsetning.
• Benmargsaspirat: minst 3 ml aspirat overføres til BACTEC MYCO F lytic (rød kork).
• Blodkultur på BACTEC MYCO F lytic (rød kork) ved mistanke om miliær TB eller disseminert MAC-infeksjon hos immunsupprimerte.

• Alle prøver, unntatt prøver fra sterile områder, blir forbehandlet med NaOH/ N-acetyl-L-cystein (NALC)-løsning.
• Målet er å oppnå dekontaminering, homogenisering og oppkonsentrering av prøvemateriale.

• Prøvene må sendes raskest mulig til laboratoriet, og må ikke utsettes for dagslys eller UV-stråling. Oppbevares kjølig til forsendelse.
• Vennligst bemerk: Prøver med mistanke om tuberkulose SKAL pakkes i transporthylse (husk å merke både prøveglass og transporthylse med pasient-ID).
• Blod og beinmargaspirat tilsendt på BACTEC MYCO F lytic (rød kork) oppbevares i romtemperatur før forsendelsen.

Metoden omfatter dyrkning og eventuelt resistensbestemmelse:

• Dyrkning utføres på spesielle medier avhengig av prøvemateriale. Alle prøver dyrkes i semi-automatisert dyrkningsystem med døgnavlesning (BACTEC MGIT 960). Utvalgte prøver dyrkes i tillegg på faste medier (Løwenstein-Jenssen eller Middelbrook 7H10).
• Identifikasjon utføres ved hjelp av molekylærgenetisk metode: PCR eller 16S rRNA gensekvensering.
• Resistensbestemmelse utføres på alle førstegangs MTB- isolater og hver 3. måned på dyrkningpositive kontrollprøver.
• Resistensbestemmelse utføres primært på følgende medikamenter: ethambutol, rifampicin, isoniazid og pyrazinamid.
• Utvidet resistensbestemmelse av MDR-isolater utføres ved ref. labortatoriet (FHI).
• Resistensbestemmelse av hurtigvoksende atypiske mykobakterier utføres på første isolatet og en gang i året deretter dersom isolatet vurderes som klinisk relavant.
• Resistensbestemmelse utføres med MIC-bestemmelse for bla. clarithromycin, amikacin, doxycyclin, trimetoprim-sulfa, linezolid og tigecyclin.
• Resistensbestemmelse av langsomt voksende atypiske mykobakterier utføres ikke rutinemessig.

I tillegg undersøkes prøver mhp MTB-kompleks DNA, eventuelt med Mycobacterium tuberculosis kompleks DNA hurtigtest, der også genotypisk rifampicinresistens kan påvises direkte i prøvemateriale.

Prøven videresendes til Oslo universitetssykehus, Ullevål.

• Dyrkning: Negativ/ Positiv med artsnavn og mengdeangivelse.
• Resistensbestemmelse av MTB- komplekset: rapporteres med S (sensitiv), I (intermedier), R (resistent).

• Mikroskopi: 1-2 virkedager.
• Dyrkning/identifikasjon:
  • Dyrkning er som oftest positiv etter 2-3 uker.
  • Negativ dyrkning ca. 6-8 uker fra prøven er mottatt og registrert.
• Resistensbestemmelse:
  • ca. 2 uker etter isolering og vekst av renkultur.

Alle nye funn av M. tuberculosis-komplekset ringes til rekvirent.

• Funn av M. tuberculosis kompleks er diagnostisk og medfører behandling.
• Funn av andre mykobakterier kan være klinisk relevant avhengig av art, mengder, lokalisasjon og klinikk.

• Mikroskopi har høy spesifisitet og sensitivtet på ca. 60 %
  • Negativ mikroskopi utelukker ikke infeksjon med mykobakterier.
  • Sensitivitet øker med antall prøver fra samme pasient og lokalisasjon.
  • Positiv mikroskopi påviser tilstedeværelse av syrefaste staver i prøvemateriale, men ikke mykobakteriearten.
• Dyrkning har høy sensitivitet, men negativ dyrkning utelukker ikke infeksjon.
  • Sensitivitet øker med antall prøver fra samme pasient og lokalisasjon.
  • Antall kolonier avspeiler mengden levende mykobakterier - dyrkningsprøver egner seg derfor til kontroll av behandlingseffekt, i motsetning til PCR.

Tuberkulose er en nominativt meldepliktig sykdom (Gruppe A).

Se Meldepliktige sykdommer til MSIS

• FHI Tuberkuloseveilederen: Diagnostikk av klinisk tuberkulose
• FHI Tuberkuloseveilederen (startside)
• Tuberkulose -verktøy for helsepersonell
• Atypisk mykobakterieinfeksjoner (mykobakterieinfeksjoner med NTM) - veileder for helsepersonell