JAK2-V617F, B

Myeloproliferativ sykdom er samlebetegnelse på en gruppe klonale hematologiske sykdommer. Philadelphiakromosom/bcr-abl-negativ myeloproliferativ sykdom omfatter i hovedsak polycytemia vera (PV), essensiell trombocytemi (ET) og primær/idiopatisk myelofibrose (PMF/IMF). Disse sykdommene er karakterisert av klonal økning av en eller flere cellelinjer (erytrocytter, leukocytter, blodplater). Det er i tillegg økt risiko for arterielle og venøse tromboser, samt på sikt utvikling av beinmargsfibrose (PV, ET) og transformasjon til akutt myelogen leukemi.

JAK2-V617F, som er en ervervet missense-mutasjon i tyrosinkinasegenet (JAK2), er vist å bidra til utvikling av disse sykdommene ved å gi kontinuerlig aktivering av flere vekstfremmende gener. JAK2-V617F sees hos omlag 95 % av pasienter med PV og hos omlag 60 % av pasienter med ET og PMF. Påvising av JAK2-V617F og andre mutasjoner i JAK2, samt myeloproliferativt leukemigen/trombopoietinreseptorgen (MPL) inngår i WHO sine diagnostiske kriterier for de forskjellige sykdommene.

Ved erytrocytose/høy hematokrit i over 2 måneder, ev. ved lavere nivåer hvis kombinert med arteriell eller venøs trombose (spesielt hos yngre pasienter og/eller ved atypisk trombose), akvagen kløe, erytromelalgi, splenomegali, leukocytose eller trombocytose.

Ved uforklarlig og vedvarende trombocytose ( > 450x10⁹/L) uten tegn til reaktiv trombocytose.

Mistanke om primær/idiopatisk myelofibrose (uspesifikke systemsymptomer, spleno- og hepatomegali, anemi og høyt eller lavt antall plater og leukocytter).

Pasientforberedelser:

Ingen.

Prøvetaking:

EDTA-blod, minimum 2 mL. Et eget glass må tas til gentest, og glasset må ikke åpnes før det sendes til laboratoriet. Prøven er holdbar i 96 timer i romtemperatur eller kjøleskap. Ved lengre tids lagring må EDTA-blodet fryses. Prøve bør ankomme laboratoriet senest onsdag/torsdag dersom det er helligdager i forbindelse med helg.

JAK2-V617F/total JAK2 ≤ 0,04 %.

Metode

In vitro kvantitativ test. Genomisk DNA ekstraheres på QiaSymphony. JAK2 villtype-DNA og mutant-DNA påvises ved bruk av kvantitativ real-time PCR med ipsogen JAK2 RGQ PCR kit fra Qiagen, som er CE-IVD-merket, på Rotor-Gene Q PCR instrument. Denne testen påviser ikke andre, mindre kjente/hyppige mutasjoner assosiert med PV, inkludert mutasjoner i ekson 12.

Analyseresultatet blir utgitt som JAK2-V617F allelbyrde (antall JAK2- V617F-alleler/totalt alleltall) i prosent.

Resultat < 0,04 % karakteriserer pasienten som JAK2-V617F NEGATIV.

> 0,04 % – < 1 %: USIKKERT. Den kliniske betydningen av en så lav andel av muterte celler er usikker, og det kvantitative resultatet i så lavt område er vanskelig å reprodusere.

> 1 % – < 3 %: POSITIV. Den kliniske betydningen av så lavt nivå mutert JAK2-V617F er usikker og må ses i sammenheng med klinikk og øvrige laboratoriefunn.

> 3 %: POSITIV.

Lav andel positive kopier < 1 % kan påvises, men kan ikke kvantiteres med sikkerhet. Den kliniske betydningen av lav andel muterte celler (typisk < 1-3 %) er usikker og det anbefales å sende inn kontrollprøve etter 3–6 måneder (2). Fravær av sekvensvarianten V617F i JAK2 genet utelukker ikke tilstedeværelse av andre mindre hyppige sekvensvarianter som kan være av betydning for å stille diagnosen MPN. Slike sekvensvarianter blir ikke undersøkt ved vår avdeling.

Gennavn: Janus kinase 2 (JAK2)

HGVS: NM_004972.3:c.1849G >T; LRG_612t1:c.1849G >T.

Andre benevninger:

JAK2 V617F

JAK2 G1849T

JAK2 p.Val617Phe

NM_004972.3(JAK2):c.1849G >T (p.Val617Phe)

COSMIC ID: COSV67569051