Beta-glukosidase (ß-glukosidase)

Analysen er en screeninganalyse ved mistanke om Gauchers sykdom

Analysen utføres kun etter avtale.

Materiale

Fullblod på filterkort (Whatman 903 TM – fås tilsendt fra oss).

Pasientforberedelse og prøvetaking

Venøs prøvetaking
Bruk EDTA- fullblod: En dråpe blod påføres prøvekortet. Bruk HIRSCHMANN ringcaps 100/200 (”føllingsrør”). Ved påføring av prøven: Sett kapillærrøret rett over sirkelen, la dråpen falle med egen kraft og den vil spre seg sakte ut over hele sirkelen. Røret skal IKKE berøre filterpapiret. Det er også viktig ikke å påføre flere lag med blod (laminering). Pass på at prøvefeltene er gjennomtrukket. NB. Må utføres innen 30 min. etter prøvetaking.

Kapillær prøvetaking
Forberedelse
Oppvarming: Sørg for god sirkulasjon ved at fingeren er varm. Dersom punksjonsstedet er kaldt, må det varmes på forhånd med en hanske fylt med passe varmt vann (ikke over 41o C). Hånden skal ikke i direkte kontakt med varmt vann, da blir huden fuktig og dette er uheldig for prøvetakingen.

Desinfeksjon: Fingeren desinfiseres etter gjeldende retningslinjer. Det er viktig at huden får tørke etterpå, minst i 15 sek. Påfør vaselin/samlesalve i et tynt lag rundt det område hvor du planlegger å stikke. Dette for at dråpen skal samle seg.

Prøvetaking
Vend helst hånden nedover. Velg vanligvis innstikksted på langfinger eller ringefingers indre side. Punkter huden med en hurtig bevegelse. Bruk en lansett. Det kan være nødvendig å klemme fingeren forsiktig for å få frem bloddråpen. Den første bloddråpen skal tørkes av.

Man har så to alternativ:

1. En stor dråpe dryppes rett i sirklene på kortet.
2. Fyll et ”føllingsrør” og fortsett som beskrevet under venøs prøvetaking (anbefales, det er lettere å få stor nok dråpe).

Merk prøven (kortet) med pasientens 11-sifrede fødselsnummer, etternavn, fornavn, dato og klokkeslett for prøvetaking. Prøven må tørkes liggende i minst 3 timer ved romtemperatur. Unngå direkte sollys.

Holdbarhet

Kortet sendes i konvolutt til
Oslo universitetssykehus
Avdeling for medisinsk biokjemi-Rikshospitalet
Analyseenhet metabolske sykdommer
Postboks 4950 Nydalen, 0424 OSLO

Sendes i lukket konvolutt. Ved langvarig forsendelse, elelr forsendelse fra utlandet, må prøven embaleres i plastpose sammen med tørkemiddel (silicagel).

2.5 – 9.0 µmol/t/L

Avdeling for medisinsk biokjemi Rikshospitalet, Seksjon for medfødte metabolske sykdommer.

Analysen utføres ~1 gang/måned. Hvis analysen er del av en generell metabolsk utredning, er svartiden 1 måned.

Gauchers sykdom er en lysosomal avleiringssykdom som arves med autosomal recessiv arvegang. Ca. 90% av pasientene har klinisk type 1 med hepatosplenomegali, anemi og trombocytopeni, samt skjelettaffeksjon. Ved type 2 sees alvorlige nevrologiske symptomer. Type 3 er en heterogen gruppe. Det finnes enzymerstatningterapi og substratreduksjonsterapi.

Ved verdier over 4.0 µmol/t/L
Normal beta-glukosidase-aktivitet. En svært sjelden gang kan det være normal enzymaktivitet på filterkort selv om pasienten har Gauchers sykdom (ved sap-C defekt). Ved fortsatt klinisk mistanke om Gauchers sykdom anbefales måling av enzymaktivitet i lymfocytter og/eller genetisk analyse (GBA- og PSAP-genet).

Ved verdier mellom 2.5 – 4.0 µmol/t/L
Beta-glukosidase-aktivitet i et gråsoneområde; dvs. over nedre referansegrense, men under 10-persentilen (4.0 µmol/t/L). Det er overlapp mellom friske med enzymaktivitet i nedre del av referanseområdet og syke. En svært sjelden gang kan normal enzymaktivitet på filterkort sees selv om pasienten har Gauchers sykdom (ved sap-C defekt). Ved fortsatt klinisk mistanke om Gauchers sykdom anbefales derfor måling av enzymaktivitet i lymfocytter og/eller genetisk analyse (GBA- og PSAP-genet).

Ved verdier under 2.5 µmol/t/L må oppfølgende analyser med måling av enzymaktivitet i lymfocytter og/eller genetisk analyse utføres.

Beta-glukosidase-aktivitet og alfa-glukosidase analyseres alltid samtidig i blod fra filterkort, som en kvalitetssikring av prøvematerialet. Lav aktivitet sees ved henholdsvis Gauchers sykdom og Pompes sykdom. Samtidig lav aktivitet av begge enzymer hos en pasient er usannsynlig, og tyder på feil ved prøven, inkludert feil ved prøvetaking eller prøvebehandling.

LC-MSMS