HFE, Hemokromatose-mutasjon

Økt jernavleiring og hemokromatose.

EDTA-fullblod

• Prøven tas på EDTA-rør. Nødvendig prøvevolum: 3 ml fullblod.
• Røret skal ikke sentrifugeres.
• EDTA-røret sendes til Hormonlaboratoriet.

Genetisk analyse påviser varianter i aminosyre 282 (HFE C282Y) og 63 (HFE H63D).

Varianten G845A fører til C282Y som innebærer at aminosyren cystein i posisjon 282 er byttet ut med tyrosin.

G854G i begge alleler gis ut som GG og betyr at mutasjon ikke er påvist. Kombinasjonen G854G pluss G854A gis ut som AG og betyr at pasienten er heterozygot for varianten. G854A i begge alleler gis ut som AA og betyr at pasienten er homozygot for varianten som kan gi arvelig hemokromatose.

Varianten C187G fører til H63D som innebærer at aminosyrenn histidin i posisjon 63 er byttet ut med asparaginsyre. Varianten C187C i begge alleler gis ut som CC og betyr at mutasjonen ikke er påvist. Kombinasjonen C187C og C187G gis ut som CG og betyr at pasienten er heterozygot for varianten. G187G i begge alleler gis ut som GG og betyr at pasienten er homozygot for varianten som gir øket risiko for arvelig hemokromatose.

Forbehandling

Ingen

Prinsipp

Real-time PCR med direkte påvisning av de genetiske varianter rs1800562 G/A (C282Y) og rs1799945 C/G (H63D) ved spesifikke fluorescerende prober.

Metode

DNA ekstraheres fra leukocytter i EDTA-fullblod og brukes som templat for en real-time PCR hvor området omkring posisjon 187 og 845 i HFE-genet amplifiseres. De genetiske variantene påvises direkte ved spesifikke fluorescerende prober.

Referansepreparat

Ikke aktuelt.

Leverandør/instrument

Metoden ble tatt i bruk ved Hormonlaboratoriet som rutineanalyse i april 1998 og endret til Real-Time PCR metode 01.04.08.

Påvisning av HFE C282Y i homozygot form er forbundet med økt jernavleiring og hemokromatose. Ca. 0,5 % av den norske befolkningen er homozygote for C282Y, mens forekomsten med hensyn til klinisk hemokromatose når man har denne varianten ( penetransen) varierer fra 5 til 50 % i forskjellige studier. Ca. 10-15 % av befolkningen er bærere av C282Y. Jernlagrene til bærere er litt høyere enn hos personer som ikke har C282Y. Dette gjelder spesielt for de av bærerne som også har en annen variant, H63D (aminosyre i posisjon 63 - histidin, byttes ut med asparagin), i HFE-genet. Det at man ikke påviser C282Y i HFE-genet utelukker ikke at pasienten har eller kan få hemokromatose.