Apts prøve, fæces/oppkast

Dette er en øyeblikkelig-hjelp-analyse som ble utviklet av den amerikanske legen Leonard Apt. Ved blod i oppkast eller feces hos nyfødte kan Apts prøve brukes til å avgjøre om blodet stammer fra barnet selv eller fra mor. Svelging av mors blod kan skje under fødselen eller under amming (såre brystvorter). Apts prøve brukes til å skille HbF (føtalt hemoglobin) fra HbA (voksent hemoglobin).

Mistanke om gastrointestinal blødning hos nyfødte basert på observasjon av blod i oppkast, aspirat eller feces.

Prøvemateriale

Fæces eller aspirat fra magesekken /oppkast/gulp) med synlig blodtilblanding.

Prøvebehandling

Pga. kort holdbarhet leveres blodtilblandet aspirat, oppkast eller fersk feces umiddelbart laboratoriets prøvemottak i lukket beholder.

Utførelse av APTS-test

Prøvemateriale slemmes opp i 3 ml saltvann og sentrifugeres i 400-500 g i 5 minutter.

Supernatanten må ha rosa/rødlig farge for å fortsette testen.

5 deler supernatant tilsettes 1% NaOH.

Vurdering

Positiv test: rødfargen beholdes i mer enn 2 min dvs blod fra barn (føtalt hemoglobin påvist).

Negativ test: fargeendring til brunt (brunfarget hematin) dvs blod fra mor.

HbF: Ingen fargeomslag.

HbA: Fargeomslag.

HbA blir denaturert av sterke baser i langt større grad enn det som er tilfellet for HbF. Ved tilsetting av lut til prøven vil HbA slå om fra rødt til brungrønt i løpet av kort tid. Det tar betydelig lengre tid før HbF endrer farge.

Feilkilder

For lang tid fra prøvetaking til analyse (eksponering for luft medfører at blodet oksideres og endrer farge til brunsvart, og dersom mye av blodet har gjennomgått denne prosessen, kan det være vanskelig å få framstilt en brukbar løsning). Feilkilder assosiert med manuell avlesning. For lite blod i prøvematerialet. Ved høy grad av persisterende HbF hos mor (sjelden!), kan det være vanskelig å avgjøre om blodet stammer fra mor eller fra den nyfødte.