• Utredning av arvelig hyperhomocysteinemi ved høye homocysteinnivåer i plasma.
• Behandling med cytostatika som for eksempel metotreksat, fluoropyrimidiner og platinaforbindelser.
  • Se www.anx.no/mthfr for mer informasjon.

Pasientforberedelse

Ingen

Prøvetaking

• EDTA-rør
• Minste prøvevolum: 0,5 mL (helst 1 mL) fullblod.

Holdbarhet

Prøven er holdbar flere døgn i romtemperatur, men oppbevaring i kjøleskap anbefales. Ved lengre tids lagring ( >1 mnd) bør prøven fryses.

Forsendelse: Ordinær post, kan sendes ved romtemperatur.

Ikke relevant.

Avdeling for medisinsk biokjemi, Rikshospitalet.

Vanligvis innen 2 uker, ta kontakt dersom det haster mer.

Forekomsten av MTHFR-genvarianter varierer mellom folkegrupper.

Frekvens av MTHFR-genvarianter (allelfrekvens):

• MTHFR c.665C>T: Ca. 12 - 37% blant kaukasiere, 20 – 22% blant asiater og rundt 13% i populasjoner fra Afrika.
• MTHFR c.1286A>C: Ca. 26 - 35% blant kaukasiere, 39 - 51% blant asiater og 12 - 15% i populasjoner fra Afrika.

Funksjon av MTHFR-enzymet

• MTHFR-enzymet spiller en viktig rolle i metabolismen av folat og homocystein.
  • MTHFR katalyserer omdannelsen av 5,10-metylentetrahydrofolat til 5-metyltetrahydrofolat, som igjen fungerer som en metyldonor og bidrar til at homocystein omdannes til metionin av enzymet metionin syntase. Denne reaksjonen trenger i tillegg vitamin B12.
• MTHFR-enzymet er involvert i DNA-syntese og -metylering.

MTHFR-genvarianter

• De best karakteriserte MTHFR-genvariantene er c.665C>T (tidligere kjent som c.677C>T) og c.1286A>C (tidligere kjent som c.1298A>C).
  • MTHFR c.665C>T gir en aminosyreendring (p.Ala222Val) som resulterer i termolabilt enzym og redusert enzymaktivitet.
  • MTHFR c.1286A>C gir en aminosyreendring (p.Glu429Ala) og er assosiert med noe redusert enzymaktivitet.

Klinisk betydning av MTHFR-genvarianter

• MTHFR-genvarianter som gir redusert MTHFR-enzymaktivitet kan føre til forhøyede homocysteinnivåer, særlig ved lave folatnivåer.

  • Høye homocysteinnivåer er assosiert med økt risiko for ulike sykdommer (f.eks. hjerte-/karsykdom).

• MTHFR-genvarianter og MTHFR-enzymaktiviteten har også blitt rapportert å kunne påvirke effekten/toksisiteten av cytostatika som bl.a. metotreksat, syklofosfamid, fluoropyrimidiner og platinaforbindelser.

Svarrapportering

• MTHFR-genotype (allelkombinasjon) rapporteres basert på det samlede resultatet etter analyse av MTHFR-variantene c.665C >T (tidligere kjent som c.677C >T) og c.1286A >C (tidligere kjent som c.1298A >C).
• Genotypesvaret inkluderer en kort tolkning av betydningen av MTHFR-genotype i forhold til homocysteinnivåer.
• Forekomst av andre sjeldne sekvensvarianter som kan ha betydning for MTHFR-enzymaktiviteten kan ikke utelukkes.

Svartolkning

Utredning av forhøyet homocystein:

• Svar: Ingen av de undersøkte sekvensvariantene er påvist (dvs. C/C i posisjon c.665 og A/A i posisjon c.1286).
  • Tolkning: Genotypen påvirker sannsynligvis ikke MTHFR-aktivitet og homocysteinkonsentrasjon i særlig grad.
    
• Svar: Pasienten er heterozygot C/T i posisjon c.665 i MTHFR-genet, og evt. også heterozygot A/C i posisjon c.1286.
  • Tolkning: Genotypen kan gi redusert MTHFR-enzymaktivitet og føre til lett økt homocysteinkonsentrasjon, særlig ved lave folatnivåer. Behandling med folsyre kan i så fall redusere homocysteinkonsentrasjonen.
    
• Svar: Pasienten er heterozygot C/T i posisjon c.665 i MTHFR-genet og i tillegg homozygot C/C i posisjon c.1286.
  • Tolkning: Genotypen er assosiert med redusert MTHFR-enzymaktivitet og kan føre til økt homocysteinkonsentrasjon, særlig ved lave folatnivåer. Behandling med folsyre kan i så fall redusere homocysteinkonsentrasjonen.
    
• Svar: Pasienten er homozygot T/T i posisjon c.665 i MTHFR-genet, og evt. også heterozygot A/C eller homozygot C/C i posisjon c.1286.
  • Tolkning: Genotypen er assosiert med redusert MTHFR-enzymaktivitet og kan føre til økt homocysteinkonsentrasjon, særlig ved lave folatnivåer. Behandling med folsyre kan i så fall redusere homocysteinkonsentrasjonen.
    
• Svar: Pasienten er heterozygot A/C eller homozygot C/C i posisjon c.1286 i MTHFR-genet (men normalsekvens, dvs. C/C, i posisjon c.665).
  • Tolkning: Genotypen påvirker sannsynligvis ikke MTHFR-aktivitet og homocysteinkonsentrasjon i særlig grad.
    

Klinisk betydning av MTHFR-genotype avhenger også av andre faktorer som påvirker homocysteinnivåer som f.eks.:

• Livsstil
  • Kosthold og vitamininntak, røyking, alkohol
• Sykdommer
  • Maligne tilstander, hypotyreose, reumatoid artritt, nyresykdommer
• Legemidler
• Alder, graviditet

Ved spørsmål om analyse og tolkning i forhold til utredning av forhøyet homocystein, ta kontakt med Seksjon for medfødte metabolske sykdommer, Avd. for medisinsk biokjemi, OUS, Rikshospitalet på tlf.: 23 07 10 48

For mer informasjon om MTHFR-genanalyse i forbindelse med legemiddelbehandling, se www.anx.no/mthfr

Usikkerhet

Pasientens genotype er i utgangspunktet stabil og uendret gjennom hele livet. Det er således normalt ikke indisert å gjenta en genotyping hvis den er utført tidligere og svaret er tilgjengelig for rapportering.

Unntak kan være:

• Ønske om ny genotyping med en mer omfattende metode: Hvis man tidligere bare har fått undersøkt én eller noen få DNA-sekvensvarianter i det aktuelle genet, kan det være aktuelt å teste påny med en ny eller mer omfattende metode som fanger opp flere varianter.
• Pasienten er transplantert: Stamcelletransplantasjon tilfører donorleukocytter, noe som vil gi endret genotype ved analysering av blodprøve. Organtransplantasjon tilfører organ med donors genotype. Blodceller og øvrige vev er da uendret.
• Mistanke om feil: Selv om det er sjelden, kan det forekomme berettiget mistanke om feil genotyperesultat. I så fall kan ny genotyping være indisert. I tillegg til prøveforbytning eller feil knyttet til analysering eller rapportering, kan det ved leukopeni i forbindelse med graviditet eller hos personer som får ordinær blodoverføring (én enhet SAG-blod kan inneholde inntil 1 million leukocytter) forekomme at det i en periode på inntil noen måneder blir en tilblanding og proliferasjon av fosters eller blodgivers leukocytter (mikrokimerisme) som kan gi endret genotyperesultat.
• Klonal ekspansjon av mutert cellelinje hos pasienten.

Rikshospitalet

Sanntids PCR med alleldeteksjon vha. hybridiseringsprober og smeltekurveanalyse på LightCycler® 480 (Roche) instrument.

Analysen omfatter undersøkelse av følgende MTHFR-genvarianter (alleler):

• NM_005957.4:c.665C>T (rs1801131); NP_005948.3:p.Ala222Val
  • (Varianten er tidligere kjent som c.677C>T)
• NM_005957.4:c.1286A>C (rs1801133); NP_005948.3:p.Glu429Ala
  • (Varianten er tidligere kjent som c.1298A>C)