Vitaminmangeldiagnostikk: Utredning og differensialdiagnose ved mistanke om kobalamin- og/eller folatmangel når tradisjonell diagnostikk er usikker. Behandlingskontroll etter kobalamin- og folatsubstitusjon.

Hjerte- og karsykdommer: Utredning av risikopersoner med familiær opphopning av tidlig (før 50-55 år) hjerte- og karsykdom eller med kjent hyperhomocysteinemi i familien. Oppfølging av dialysepasienter og pasienter med nyreinsuffisiens. Generell screening i befolkningen for hyperhomocysteinemi (p-homocystein >15 µmol/L) anbefales ikke foreløpig.

Mistanke om homocysteinuri.

Pasientforberedelse
Pasienten trenger ikke være fastende i forbindelse med diagnostikk av vitaminmangel. For utredning og kontroll av risiko for arteriosklerotisk hjerte-karsykdom bør prøvetakingsprosedyrene være standardiserte, blant annet med hensyn til prøvetakingstidspunkt, og pasienten bør være fastende. Dette er nødvendig for å kunne sammenlikne resultater i prøver som er tatt på ulike dager.

Prøvetaking
EDTA-rør med gel (plasmarør)

Glasset legges til kjøling dersom prøven ikke sentrifugeres straks(innen 5 min) etter prøvetaking. Avkjølte prøver må sentrifugeres innen 6 timer Plasma avpippeteres dersom det ikke tas på PPT rør.

Holdbarhet:

5 dager kjøleskap

Oppbevaring:

Prøvene oppbevares i 7 dager etter ankomst på laboratoriet.

Homocystein er en endogen aminosyre som dannes i cellene ved omdanning av den essensielle aminosyren metionin. Den intracellulære omsetningen av homocystein avhenger hovedsakelig av tre vitaminer: Folat, Aktivt- B12, Holotranskobalamin og Vitamin B6. Omkring 50 % av homocystein blir remetylert til metionin i en reaksjon katalysert av metioninsyntase med metylkobalamin som kofaktor og N5-metyltetrahydrofolat som metyldonor.

Kobalamin- og/eller folatmangel hemmer remetylering av homocystein til metionin med det resultat at nivået av homocystein stiger, mens metioninnivået reduseres. Enzymet metioninsyntase er det eneste som kan demetylere N5-metyltetrahydrofolat og ettersom den metylerte folatformen ikke kan brukes i andre enzymatiske reaksjoner får man ved kobalaminmangel samtidig en funksjonell folatmangel, som kan påvirke DNA-syntesen og forstyrre celledelingen. Dette rammer spesielt vev med rask celledeling, som hematopoiese, og gir hypersegmenterte granulocytter og megaloblastær anemi.

P-homocystein er en følsom indikator for mangel på folat og kobalamin. Homocystein utgjør således et viktig koblingspunkt mellom kobalamin- og folatstoffskiftet og forklarer det biokjemiske grunnlaget for den kjente kliniske sammenhengen mellom kobalaminmangel og forstyrrelser i folatomsetningen.

Homocystein kan i tillegg omformes til cystein i en transsulfureringsreaksjon. Transsulfureringen er en reaksjonskjede som starter med enzymet cystationin-ß-syntase, som har vitamin B6 som kofaktor. Defekter i dette enzymet er den vanligste årsak til den medfødte tilstanden homocysteinuri, som er autosomal recessiv, og som i sin homozygote form kan gi en svært høy homocysteinkonsentrasjon i blodet ( >200 µmol/L) og økt utskillelse av homocystein i urinen. Tilstanden er sjelden og ytrer seg på ulike måter med marfanoid utseende, luksasjon av øyets linse, skjelettanomalier, mental retardasjon og alvorlig hjerte- og karsykdom med høy dødelighet før fylte 30 år. Vitamin B6-mangel fører som regel ikke til en betydelig økning av fastende p-homocystein, men kan avsløres ved hjelp av en metioninbelastningstest.

Homocystein er en reaktiv substans som kan forårsake oksidativ celleskade. Høy p-homocystein kan skade endotel og medvirke til utvikling av arteriosklerotisk karsykdom. Hos barn og unge med homocysteinuri er hjerte- og karsykdom i meget ung alder vanlig forekommende, mens tromboembolisk sykdom forekommer i alle aldersgrupper.

Metionin er kroppens viktigste metyldonor og en reduksjon av nivået som følge av manglende remetylering av homocystein pga. folat og/eller kobalaminmangel kan gi hypometylering av DNA, noe som er assosiert med en rekke sykdommer, blant annet kreftutvikling.

I plasma forekommer homocystein i forskjellige former, både fritt og proteinbundet, oksidert og redusert, og i forskjellige disulfidformer. Ved analyse av homocystein bestemmes som regel den totale mengden av homocystein i redusert form ved å frigjøre homocystein fra proteinbinding og å underkaste alle formene et reduksjonssteg.

Analysen blir gitt ut med automatisk analysekommentar hvis HCY er utenfor referanseområdet:

Homocystein kan være falskt forhøyet pga nedsatt nyrefunksjon.

Ved Folat < 7 nmol/l: Sannsynlig Folatmangel.

Høye verdier

Graden av hyperhomocysteinemi kan gi en pekepinn på årsaken. Man skiller mellom alvorlig ( >100 µmol/L), intermediær (30-100 µmol/L) og lett (15-30 µmol/L) hyperhomocysteinemi.

Langt de fleste hyperhomocysteinemitilstander skyldes vitamin B12- og folatmangel. Hos voksne er homocystein først og fremst en markør på folatstatus, mens den hos spedbarn er en markør på vitamin B12-status. Vitamin B6-mangel har som regel liten effekt på fastende p-homocystein, men sterkere innflytelse på økning av p-homocystein etter metioninbelastning.

Hyperhomocysteinemi sees også regelmessig ved høy alder, nedsatt nyrefunksjon, hypotyreose, systemisk lupus erythematosus, psoriasis, revmatoid artritt, cancer og akutte leukemiformer. Dessuten kan bruk av visse legemidler som metformin, syresekresjonshemmere, antiepileptika, neomycin, PAS, lystgass, metotreksat og teofyllin være assosiert med forhøyet p-homocystein.

Alvorlig hyperhomocysteinemi: Pasienter med homocysteinuri (cystationinbetasyntetasedefekt i homozygot form) kan ha meget høye verdier ( >100 µmol/L). Det samme gjelder pasienter med alvorlig vitamin B12-mangel.

Intermediær hyperhomocysteinemi: Ses typisk hos pasienter med vitamin B12- og folatmangel. Alvorlig nyreinsuffisiens kan også være en årsak. Homocysteinverdier mellom 40-100 µmol/L ses hos pasienter som har en medfødt defekt av enzymet 5,10-metylentetrahydrofolatreduktase (MTHFR) i homozygot form i kombinasjon med lav folatstatus (< 10-15 nmol/L). Denne defekten er relativt hyppig forekommende og ca. 10 % av den norske befolkning er homozygot for tilstanden.

Lett hyperhomocysteinemi: Ses typisk ved milde former for vitamin B12- og folatmangel, MTHFR-defekter, redusert nyrefunksjon og høy alder. Vitamin B12-mangel er funnet å være hyppig hos morsmelkernærte spedbarn og dette gir forhøyede homocysteinnivåer (6,5-20 µmol/L). Typiske symptomer er forsinket psykomotorisk utvikling, spisevegring og obstipasjon, men symptomene er ofte diffuse, og vitamin B12-mangel er vist å ha en diagnostisk delay på fire måneder i denne aldersgruppen. Hos spedbarn og småbarn er MMA ofte høy grunnet dietære forhold og er derfor en dårlig vitamin B12-markør. Hos sped- og småbarn bør man derfor benytte homocystein som en markør på vitamin B12-status.

Lave verdier

Lave verdier sees ved Downs syndrom og hos gravide. I svangerskapsuke 18 er homocysteinnivået omkring 50 % av ikke-gravide verdier (2,80- 7,5 µmol/L: 2,5 og 97,5 percentil) grunnet plasmavolumfortynning og østrogenpåvirkning, noe som gjør det vanskelig å bruke homocystein som en markør på vitamin B12- og folatstatus hos gravide. Inntak av penicillamin og høye doser av folinsyre kan senke p-homocystein.

Feilkilder

I prøver som står for lenge før plasma skilles fra blodlegemene vil homocysteinnivået øke på grunn av produksjon av homocystein i blodlegemene med lekkasje til plasma. Denne prosessen hemmes når prøven står kaldt. Ved bruk av visse HPLC-metoder for bestemmelse av p-homocystein kan høye plasmakonsentrasjoner av immunglobulinkjeder ved myelomatose føre til analytisk interferens og gi falskt for høye p-homocysteinverdier.

Analytisk variasjon og måleusikkerhet