Analyser

Sekvensering 16s rRNA

Sist oppdatert: 24.09.2024
  Sendeprøve: Haukeland Universitetssjukehus
Utgiver: Helse Møre og Romsdal
Versjon: 0.3
Forfatter: Ida Sletteberg
Kopier lenke til dette emnet
Foreslå endringer/gi kommentarer

Indikasjon for prøvetaking 

  • Når dyrking eller artsspesifikke analyser ikke fører fram
  • Når pasienten har stått på antibiotika før prøvetaking
  • Når man antar at det er så få mikrober tilstede i prøven at de ikke vil vokse ved dyrkning
  • Ved mistanke om spesielle mikrober som er vanskelig å dyrke

Prøvemateriale 

  • Prøver fra normalt sterilt område.
  • Prøver fra mistenkte ortopediske infeksjoner uten påviste mikrober ved dyrkning eller ved spesifikk PCR-metodikk.

 

Kan ikke utføres på blod eller fra blodkulturflasker.

Rekvirering  

Undersøkelsen må avtales med vakthavende mikrobiolog før prøvetakning. Sendeskjema til Mikrobiologi ved Haukeland Universitetssjukehus fylles ut og leveres til mikrobiologisk laboratorium.

Prøvetaking og behandling 

Prøvemateriale på sterilt glass uten tilsetninger.

Oppbevaring og forsendelse 

Prøver må ankomme laboratoriet så raskt som mulig etter prøvetaking, helst i løpet av 2 døgn for å unngå tap av mikrobielt DNA.

Prøver må ikke fryses, men oppbevares i kjøleskap før forsendelse.

Kan transporteres i romtemperatur.

Undersøkelsesprinsipp 

Sanntids polymerasekjedereaksjon (PCR). Dersom denne er positiv, gjøres sekvensering av 16S rDNA-regionen i det bakterielle DNA-produktet. Påvist sekvens sammenliknes med kjente sekvenser fra databaser. Ved høy grad av overensstemmelse etter definerte kriterier utledes artsnavn, eventuelt slektsnavn.

Utførende laboratorium 

Haukeland Universitetssjukehus

Svar 

Bakterielt DNA: Kvalitativt (f.eks. Påvist/Ikke påvist)

Videre sekvensert bakterielt DNA: Taksonomi (mikrobenavn, subtype osv)

Svartid 

4-7 virkedager.

Lokale variasjoner kan forekomme.

Merknader 

  • Spesifikke DNA undersøkelser er mer sensitive og bør prioriteres når de er tilgjengelige.
  • Analysen er ressurs- og tidkrevende, sekvensering gjøres derfor ikke på prøver med dårlig klinisk indikasjon eller hvor prøvematerialet er uegnet for analysen.
  • Analysen er mindre egnet der det foreligger en blanding av flere bakterier i prøvematerialet.